化學(xué)發(fā)光免疫分析方法創(chuàng)建于 1977 年，是 Halmann 等人在放射免疫分析和酶免疫實(shí)驗(yàn)理論的基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)精心探索與創(chuàng)新的成果。當(dāng)時(shí)，放射免疫分析雖具有較高的靈敏度，但存在放射性污染等安全隱患；酶免疫實(shí)驗(yàn)雖操作相對(duì)簡(jiǎn)便，但在靈敏度方面存在一定局限。Halmann 等人巧妙地將免疫反應(yīng)的高特異性與化學(xué)發(fā)光的高靈敏性相結(jié)合，成功建立了一種用于檢測(cè)微量抗原、抗體、激素、酶等的新型免疫學(xué)分析方法，為醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域帶來(lái)了新的曙光。這一創(chuàng)新方法一經(jīng)問(wèn)世，便迅速引起了廣泛關(guān)注，并在后續(xù)的發(fā)展中不斷完善和壯大。
一、直接化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定的原理
化學(xué)發(fā)光的原理基于化學(xué)發(fā)光物質(zhì)在特定條件下的反應(yīng)。當(dāng)化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化后，會(huì)形成一個(gè)激發(fā)態(tài)的中間體。而當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體從高能級(jí)回到穩(wěn)定的基態(tài)時(shí)，會(huì)同時(shí)發(fā)射出光子，這一過(guò)程便是化學(xué)發(fā)光的本質(zhì)。
在直接化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定中，采用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)（吖啶酯或異魯米諾）等直接標(biāo)記抗體（或抗原）。當(dāng)標(biāo)記后的抗體（或抗原）與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（或抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，會(huì)形成固相包被抗體 - 待測(cè)抗原 - 發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記抗體復(fù)合物。此時(shí)，只需加入氧化劑過(guò)氧化氫和氫氧化鈉形成堿性環(huán)境，發(fā)光物質(zhì)在不需要酶的催化作用下便會(huì)分解、發(fā)光。
這種直接標(biāo)記和簡(jiǎn)單的發(fā)光反應(yīng)機(jī)制，使得直接化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定具有快速、靈敏的特點(diǎn)，能夠在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生明顯的發(fā)光信號(hào)，為檢測(cè)提供清晰、準(zhǔn)確的依據(jù)。
二、固相載體的選擇
在直接化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定中，固相載體的選擇對(duì)檢測(cè)性能有著重要影響。固相載體主要分為板式分離和磁珠分離，早期的板式分離可選擇不透明的白色平板，這種平板能夠減少光管道和串?dāng)_，一定程度上提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。然而，隨著技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在大多選擇了磁微粒（超順磁珠）。磁微粒相較于板式分離具有諸多優(yōu)勢(shì)，它能夠極大地?cái)U(kuò)大抗原抗體結(jié)合表面積，為抗原或抗體提供更多的結(jié)合位點(diǎn)，從而增加抗原或抗體的結(jié)合量。磁微粒能夠迅速捕獲抗原抗體，并且在反應(yīng)結(jié)束后，易于實(shí)現(xiàn)結(jié)合相、游離相的分離，有效減少了雜質(zhì)的干擾，進(jìn)一步提高了檢測(cè)準(zhǔn)確性。
三、湖北新德晟專注研發(fā)吖啶酯
湖北新德晟在直接化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定領(lǐng)域中使用的吖啶酯具有顯著優(yōu)勢(shì)。其試劑穩(wěn)定性好，易于保存，這一特性使得在實(shí)際應(yīng)用中，試劑能夠在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持良好的性能，減少了因試劑變質(zhì)而導(dǎo)致的檢測(cè)誤差和浪費(fèi)。其次，標(biāo)記物為小分子，對(duì)標(biāo)記的抗原/抗體的空間位點(diǎn)幾乎不造成影響，這意味著在標(biāo)記過(guò)程中，能夠最大程度地保留抗原/抗體的活性和特異性，保證免疫反應(yīng)的順利進(jìn)行。此外，吖啶酯受外界環(huán)境干擾較少，本底低，結(jié)果穩(wěn)定。在復(fù)雜的臨床樣本檢測(cè)中，較低的本底能夠有效避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)，使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。這些優(yōu)勢(shì)使得新德晟的吖啶酯在直接化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定中備受青睞，為眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)和科研單位提供了優(yōu)質(zhì)的檢測(cè)原料。
四、提高吖啶酯檢測(cè)系統(tǒng)靈敏度的方法
為進(jìn)一步提高吖啶酯檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度，科研人員不斷探索，總結(jié)出了以下幾種有效方法：
1、通過(guò)修飾吖啶酯本身化學(xué)結(jié)構(gòu)，在磺酰胺離去基團(tuán)上引入特定的吸電子基團(tuán)，能夠顯著提高產(chǎn)光效率。這種化學(xué)結(jié)構(gòu)的修飾能夠改變吖啶酯分子的電子云分布，使其在發(fā)光反應(yīng)中更容易產(chǎn)生光子，從而增強(qiáng)發(fā)光信號(hào)。
2、提高吖啶酯的親水性能，能夠使檢測(cè)試劑有更低的背景，進(jìn)而提高信噪比。在實(shí)際檢測(cè)中，低背景能夠減少干擾信號(hào)的影響，使微弱的目標(biāo)信號(hào)更容易被檢測(cè)到。
3、加入表面活性劑也能增加吖啶酯的產(chǎn)光效率。表面活性劑能夠改變吖啶酯分子周圍的微環(huán)境，促進(jìn)其與氧化劑等反應(yīng)物質(zhì)的接觸和反應(yīng)，從而提高發(fā)光效率。
通過(guò)這些方法的綜合應(yīng)用，能夠不斷提升吖啶酯檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度，使其在微量生物標(biāo)志物檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮更大的作用。
湖北新德晟作為吖啶酯研發(fā)生產(chǎn)廠家，可以供應(yīng)純度99%的產(chǎn)品，發(fā)光靈敏穩(wěn)定，在直接化學(xué)發(fā)光測(cè)定領(lǐng)域一直在發(fā)揮自己的力量，幫助各項(xiàng)發(fā)光實(shí)驗(yàn)順利完成。如果您有吖啶酯需要，歡迎隨時(shí)聯(lián)系！
