在生化檢測(cè)過(guò)程中，生化試劑的相互干擾是影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素。深入了解試劑相互干擾的類型，并掌握有效的實(shí)驗(yàn)排查方法，對(duì)于保障臨床診斷的可靠性是關(guān)鍵。

一、生化試劑相互干擾的類型
1、直接干擾：試劑中含有下一個(gè)檢測(cè)所要測(cè)定的底物，或是含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)的底物有作用，從而直接干擾下一反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果。在血糖檢測(cè)中，如果前一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的試劑中殘留有葡萄糖，而后續(xù)檢測(cè)項(xiàng)目恰好是血糖測(cè)定，那么殘留的葡萄糖會(huì)直接參與血糖檢測(cè)反應(yīng)，導(dǎo)致血糖測(cè)定結(jié)果偏高，嚴(yán)重影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性。這種直接干擾會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏離真實(shí)值，誤導(dǎo)臨床診斷。
2、間接干擾：該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)間接的干擾。在有試劑污染的情況下，下一個(gè)測(cè)試所測(cè)定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。一些酶類試劑在反應(yīng)過(guò)程中可能會(huì)改變反應(yīng)體系的 pH 值、離子強(qiáng)度等條件，而這些變化可能會(huì)影響后續(xù)檢測(cè)項(xiàng)目中酶的活性或反應(yīng)平衡，進(jìn)而間接干擾檢測(cè)結(jié)果。免疫比濁法檢測(cè)中，前一個(gè)反應(yīng)殘留的某些物質(zhì)可能會(huì)影響濁度的測(cè)定，使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。

3、pH 值改變干擾：試劑中反應(yīng)緩沖液之間因儀器攜帶污染而使下一反應(yīng)的 pH 值改變，導(dǎo)致下一反應(yīng)達(dá)不到最佳狀態(tài)。雙縮脲法測(cè)血清總蛋白時(shí)，反應(yīng)在堿性（pH 值 8 - 9）條件下，蛋白肽鍵（—CONH）才能與堿性銅溶液作用生成紫色反應(yīng)，從而準(zhǔn)確測(cè)出血清蛋白的總量。若 pH＜8 時(shí)，總蛋白測(cè)定結(jié)果偏低，這不僅直接影響球蛋白、白蛋白 / 球蛋白的結(jié)果，還可能導(dǎo)致對(duì)患者蛋白質(zhì)代謝情況的誤判。在酶活力測(cè)定中，酶在最適 pH 值時(shí)反應(yīng)最快、靈敏度最高，但由于緩沖能力有限，儀器攜帶污染可能使酶促反應(yīng)體系的 pH 值偏離最適范圍，導(dǎo)致酶促反應(yīng)出現(xiàn)無(wú)效值，無(wú)法準(zhǔn)確反映酶的真實(shí)活性。

二、干擾的排查和發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)
1、試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測(cè)定：將某一試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測(cè)定，通過(guò)考察結(jié)果的情況，能夠確定發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成直接干擾的項(xiàng)目。在實(shí)際操作中，對(duì)于雙試劑的 R1、R2 兩種都要進(jìn)行此項(xiàng)測(cè)試，這樣在后續(xù)解決干擾問(wèn)題時(shí)更具針對(duì)性。如果將某一試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測(cè)定后，發(fā)現(xiàn)血糖項(xiàng)目結(jié)果異常升高，且該試劑中恰好含有葡萄糖或能與血糖檢測(cè)試劑發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)，那么就可以初步判斷該試劑對(duì)血糖檢測(cè)存在直接干擾。通過(guò)這種方法，可以快速定位可能存在干擾的試劑與檢測(cè)項(xiàng)目之間的關(guān)系。
2、樣本添加試劑對(duì)比測(cè)定：將 1 份樣本分為兩份，一份加生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)南♂屢?，另一份加等量的試劑，同時(shí)測(cè)定并考察結(jié)果的變化，以此來(lái)確定可能發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成干擾的項(xiàng)目。在肝功能檢測(cè)中，將同一份血清樣本分為兩份，一份添加生理鹽水作為對(duì)照，另一份添加可能存在干擾的試劑，然后同時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)氨酶等項(xiàng)目的測(cè)定。若添加試劑的樣本轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定結(jié)果與對(duì)照樣本相比出現(xiàn)明顯差異，且排除其他因素后，就可以推測(cè)該試劑對(duì)轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)存在干擾。這種對(duì)比測(cè)定的方法能夠直觀地觀察到試劑對(duì)樣本檢測(cè)結(jié)果的影響，有助于發(fā)現(xiàn)潛在的干擾情況。
3、特定項(xiàng)目先后測(cè)定及統(tǒng)計(jì)分析：當(dāng)懷疑Ａ項(xiàng)試劑對(duì)Ｂ項(xiàng)目存在干擾時(shí)，可以用樣本先單做Ｂ項(xiàng)目若干次；然后先做Ａ項(xiàng)目，接著做Ｂ項(xiàng)目若干次。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，可以明確Ａ試劑通過(guò)試劑針對(duì)Ｂ項(xiàng)目的干擾程度。在血脂檢測(cè)中，懷疑膽固醇檢測(cè)試劑對(duì)甘油三酯檢測(cè)存在干擾，先對(duì)一批樣本單獨(dú)進(jìn)行甘油三酯檢測(cè)，記錄結(jié)果；然后對(duì)相同樣本先進(jìn)行膽固醇檢測(cè)，再進(jìn)行甘油三酯檢測(cè)，同樣記錄結(jié)果。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)兩次甘油三酯檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差等參數(shù)，通過(guò)比較差異的顯著性，判斷膽固醇檢測(cè)試劑對(duì)甘油三酯檢測(cè)是否存在干擾以及干擾的程度大小。

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