在免疫測(cè)定領(lǐng)域，夾心法作為一種經(jīng)典且高效的檢測(cè)方法，憑借其獨(dú)特的原理和顯著的優(yōu)勢(shì)，在生物樣本分析中發(fā)揮著重要作用。根據(jù)檢測(cè)物質(zhì)的不同，夾心法可分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法，這兩種方法在臨床診斷、科研檢測(cè)等多個(gè)場(chǎng)景中廣泛應(yīng)用。了解它們的原理、優(yōu)缺點(diǎn)，有助于我們更好地選擇合適的檢測(cè)方法，提升檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。

一、雙抗體夾心法
1、反應(yīng)原理
雙抗體夾心法以抗原為檢測(cè)目標(biāo)。在檢測(cè)過程中，首先將捕獲抗體固定在固相載體上，當(dāng)含有待測(cè)抗原的樣本加入后，樣本中的待測(cè)抗原會(huì)與固相載體上的捕獲抗體發(fā)生特異性結(jié)合，形成“固相載體 - 捕獲抗體 - 待測(cè)抗原”復(fù)合物。隨后，通過清洗步驟去除未結(jié)合的雜質(zhì)，再加入標(biāo)記抗體。標(biāo)記抗體同樣能夠特異性地識(shí)別并結(jié)合待測(cè)抗原的另一個(gè)抗原表位，從而形成“固相載體 - 捕獲抗體 - 待測(cè)抗原 - 標(biāo)記抗體”雙抗體夾心復(fù)合物。最終，通過檢測(cè)標(biāo)記抗體所攜帶的信號(hào)，如酶催化底物產(chǎn)生的顯色信號(hào)或發(fā)光物質(zhì)發(fā)出的光信號(hào)，且該檢測(cè)信號(hào)與樣本中待測(cè)抗原的量成正相關(guān)，以此實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)抗原的定量分析。
2、應(yīng)用場(chǎng)景與優(yōu)勢(shì)

雙抗體夾心法在傳染病抗原檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。由于使用了兩種不同的特異性抗體，該方法具有極高的靈敏度，能夠檢測(cè)出樣本中微量的抗原。其特異性也非常出色，兩種抗體的雙重識(shí)別機(jī)制有效降低了非特異性結(jié)合的概率，減少了假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。此外，雙抗體夾心法的信號(hào)值和抗原濃度值之間呈現(xiàn)良好的比例關(guān)系，使得檢測(cè)曲線寬、線性好，便于準(zhǔn)確地進(jìn)行定量分析。

二、雙抗原夾心法
1、反應(yīng)原理：雙抗原夾心法主要用于檢測(cè)樣本中的抗體。其原理是將捕獲抗原固定在固相載體上，當(dāng)樣本中的待測(cè)抗體加入后，待測(cè)抗體與固相載體上的捕獲抗原發(fā)生特異性結(jié)合，形成“固相載體 - 捕獲抗原 - 待測(cè)抗體”復(fù)合物。經(jīng)過清洗去除未結(jié)合的物質(zhì)后，再加入標(biāo)記抗原。標(biāo)記抗原同樣能夠特異性地與待測(cè)抗體結(jié)合，從而形成“固相載體 - 捕獲抗原 - 待測(cè)抗體 - 標(biāo)記抗原”雙抗原夾心復(fù)合物。通過檢測(cè)標(biāo)記抗原所產(chǎn)生的信號(hào)強(qiáng)度，即可得知樣本中待測(cè)抗體的含量，且檢測(cè)信號(hào)與樣本中待測(cè)抗體的量成正相關(guān)。

2、適用范圍與特點(diǎn)：雙抗原夾心法在自身免疫性疾病抗體檢測(cè)、傳染病抗體篩查等方面發(fā)揮著重要作用。與雙抗體夾心法類似，它也具有較高的靈敏度和特異性，能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出樣本中的抗體。由于檢測(cè)的是總抗體，在某些情況下，這一特點(diǎn)可以快速判斷樣本中是否存在抗體，無需區(qū)分抗體的具體種類。然而，當(dāng)需要對(duì)抗體亞型進(jìn)行區(qū)分時(shí)，這一特點(diǎn)則可能成為限制因素。

 

三、雙抗體夾心法與雙抗原夾心法的優(yōu)缺點(diǎn) 
1、共同優(yōu)點(diǎn)：兩種方法均利用了抗體或抗原的特異性結(jié)合，靈敏度高，能夠檢測(cè)到低濃度的目標(biāo)物；使用兩種不同的抗體或抗原，有效降低了非特異性結(jié)合，特異性好；信號(hào)值和濃度值的比例關(guān)系良好，檢測(cè)曲線寬、線性好，便于定量分析；反應(yīng)原理簡(jiǎn)單，操作相對(duì)容易，易于在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)施。 
2、共同缺點(diǎn)：它們都易受類風(fēng)濕因子（RF）、異嗜性抗體、人抗動(dòng)物抗體等干擾物質(zhì)的影響。為解決這一問題，通常需要加入阻斷劑或者對(duì)原料進(jìn)行改造，這無疑增加了檢測(cè)成本。當(dāng)使用夾心法檢測(cè)抗體時(shí)，只能檢測(cè)樣本中的總抗體，無法對(duì)抗體的種類進(jìn)行區(qū)分。

在免疫測(cè)定夾心法的應(yīng)用過程中，優(yōu)質(zhì)的原料是確保檢測(cè)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵。湖北新德晟材料科技有限公司專注于體外診斷試劑原料的研發(fā)與生產(chǎn)，為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法提供了高品質(zhì)的原料支持。憑借卓越的產(chǎn)品質(zhì)量和專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，湖北新德晟成為眾多實(shí)驗(yàn)室和企業(yè)在免疫測(cè)定領(lǐng)域值得信賴的合作伙伴。如果您有采購(gòu)需要，歡迎隨時(shí)聯(lián)系！